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有句俗话说的好，摔了一跤拾个大铜钱。生活不顺别太早绝望，塞翁失马，焉知非福。
可卢赫却恰恰相反。乐极生悲甜中生苦，他完全是拾了个大铜钱后，立马摔了一跤。
天使顺利地成长着，不出几天，它身上的粉嫩便被奶白色取代，看起来香香软软的，让人忍不住想嘬一口。
可天使未来的兄弟姐妹们就没有他的好运了。三眼仔受精失败，第二枚蛋仍旧是白蛋。皮卡丘也不给力，第一枚蛋是个弱精蛋。
这天，卢赫照常检查蛋况，菜菜幽幽地从他身边飘过，径直往二楼上。
“你干嘛去？”卢赫叫住她。
“吃饭去啊。”菜菜有气无力。
“你最近都干什么呢，一天到晚的见不到人。你昨天忘给小崽子们喂饭了吧，它们刚才看见我跟见到亲妈一样亲。”
“啊，我的错，我下次注意。”菜菜说完，头也不回地继续往楼上走。
卢赫继续照蛋，没一会儿，就见菜菜边抹嘴边走下楼，一溜烟钻进了细胞间。
“这姑娘又魔怔了？”卢赫说着，放好手里的蛋尾随菜菜进了细胞间。
他对着满桌面的文件夹感叹道：“呵。你可真能干啊，泳了这么多张图。怎么了？出错频繁浪费试剂了不敢跟我说？”
菜菜连连摇头，“出错是不可能出错的，就是这结果，太诡异。你自己看吧。”说完，她闪身到一边。
卢赫一脸不可置信地凑上前。一张一张电泳图谱翻过，他的眉头逐渐蹙成一团。
那些灰黑色底色的图片上，有的是一条亮线，有的是3条，有的是多条，有的颜色稀碎像一幅胡乱渲染的水墨画。
“这个3条的是哪个样本的？”卢赫指着屏幕问。
“当然不是2号，否则我会愁成这样吗？”菜菜抱胸倚靠着桌子，一脸疲惫道：“你设计的3种剪切方式，第一种在靶标基因上下游各切一次，然后给出hdR模板，同源修复。第二种，在靶标基因内切一次，造成移码突变，末端连接。第三种，在靶标基因上游敲入一个终止子，然后给出hdR模板，同源修复。”
“用软件进行脱靶分析的时候，这三种方法的数值都相当不错。1号82分，2号77分，3号69分。一般来说，超过60分的都具有操作可行性。可是电泳结果你也看到了，1号要么一条亮带要么稀碎，2号要么多条要么稀碎，3号全都只有一条亮带。”
“总结来说就是，全脱靶，剪切效率0%。”菜菜嘟着嘴，接着补充道：“我合成了多个RNp，也电泳了多次，结果都大差不差。最好的情况是1号有一次泳出了个38%的剪切效率，能用，但风险太大。给龟做导入可不比蜥蜴容易，导完了之后没效率，那不是白折腾吗？”
卢赫的手又抚上了他下巴上并不存在的胡须，思考片刻，幽幽开口，“再来一次。”
“啊？”菜菜疑惑不已。
“再来几次。泳出38%的RNp再泳几次，同时再合成一个1号的RNp，看看效率。”
菜菜不可思议极了，“结果肯定是一样的啊。我用的是一样的试剂，同一把移液枪，调的时候都是从大往小调，我需要800μl时，都是先调到1000μl再回拨。该换枪头的时候我都换了，我真没出错。”
“我没说你出错。你能泳出一个38%，那肯定是有道理的。可能是那一次碰巧有一部分RNp结合到了正确的位置，发挥了一点正确的作用。总体结果再离谱都无所谓，只要有一次效率能上60%，我们就可以拿那一次的RNp去导入。”
“你这不是异想天开吗？”菜菜更加费解了，“就算有一次碰巧碰上了60%，你也保证不了你导入的时候它效率... -->>
有句俗话说的好，摔了一跤拾个大铜钱。生活不顺别太早绝望，塞翁失马，焉知非福。
可卢赫却恰恰相反。乐极生悲甜中生苦，他完全是拾了个大铜钱后，立马摔了一跤。
天使顺利地成长着，不出几天，它身上的粉嫩便被奶白色取代，看起来香香软软的，让人忍不住想嘬一口。
可天使未来的兄弟姐妹们就没有他的好运了。三眼仔受精失败，第二枚蛋仍旧是白蛋。皮卡丘也不给力，第一枚蛋是个弱精蛋。
这天，卢赫照常检查蛋况，菜菜幽幽地从他身边飘过，径直往二楼上。
“你干嘛去？”卢赫叫住她。
“吃饭去啊。”菜菜有气无力。
“你最近都干什么呢，一天到晚的见不到人。你昨天忘给小崽子们喂饭了吧，它们刚才看见我跟见到亲妈一样亲。”
“啊，我的错，我下次注意。”菜菜说完，头也不回地继续往楼上走。
卢赫继续照蛋，没一会儿，就见菜菜边抹嘴边走下楼，一溜烟钻进了细胞间。
“这姑娘又魔怔了？”卢赫说着，放好手里的蛋尾随菜菜进了细胞间。
他对着满桌面的文件夹感叹道：“呵。你可真能干啊，泳了这么多张图。怎么了？出错频繁浪费试剂了不敢跟我说？”
菜菜连连摇头，“出错是不可能出错的，就是这结果，太诡异。你自己看吧。”说完，她闪身到一边。
卢赫一脸不可置信地凑上前。一张一张电泳图谱翻过，他的眉头逐渐蹙成一团。
那些灰黑色底色的图片上，有的是一条亮线，有的是3条，有的是多条，有的颜色稀碎像一幅胡乱渲染的水墨画。
“这个3条的是哪个样本的？”卢赫指着屏幕问。
“当然不是2号，否则我会愁成这样吗？”菜菜抱胸倚靠着桌子，一脸疲惫道：“你设计的3种剪切方式，第一种在靶标基因上下游各切一次，然后给出hdR模板，同源修复。第二种，在靶标基因内切一次，造成移码突变，末端连接。第三种，在靶标基因上游敲入一个终止子，然后给出hdR模板，同源修复。”
“用软件进行脱靶分析的时候，这三种方法的数值都相当不错。1号82分，2号77分，3号69分。一般来说，超过60分的都具有操作可行性。可是电泳结果你也看到了，1号要么一条亮带要么稀碎，2号要么多条要么稀碎，3号全都只有一条亮带。”
“总结来说就是，全脱靶，剪切效率0%。”菜菜嘟着嘴，接着补充道：“我合成了多个RNp，也电泳了多次，结果都大差不差。最好的情况是1号有一次泳出了个38%的剪切效率，能用，但风险太大。给龟做导入可不比蜥蜴容易，导完了之后没效率，那不是白折腾吗？”
卢赫的手又抚上了他下巴上并不存在的胡须，思考片刻，幽幽开口，“再来一次。”
“啊？”菜菜疑惑不已。
“再来几次。泳出38%的RNp再泳几次，同时再合成一个1号的RNp，看看效率。”
菜菜不可思议极了，“结果肯定是一样的啊。我用的是一样的试剂，同一把移液枪，调的时候都是从大往小调，我需要800μl时，都是先调到1000μl再回拨。该换枪头的时候我都换了，我真没出错。”
“我没说你出错。你能泳出一个38%，那肯定是有道理的。可能是那一次碰巧有一部分RNp结合到了正确的位置，发挥了一点正确的作用。总体结果再离谱都无所谓，只要有一次效率能上60%，我们就可以拿那一次的RNp去导入。”
“你这不是异想天开吗？”菜菜更加费解了，“就算有一次碰巧碰上了60%，你也保证不了你导入的时候它效率... -->>
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